稳定表达核仁素的H9C2细胞株的建立和鉴定

作者：宋娟; 张任飞; 张彬; 蒋碧梅

来源：长治医学院学报, 2009, (02): 88-90.

DOI：10.3969/j.issn.1006-0588.2009.02.003

• 核仁素
• H9C2细胞
• 基因转染 Nucleolin
• H9C2 cell line
• Gene transfection

目的:建立稳定表达核仁素的H9C2大鼠心肌细胞株,为进一步研究核仁素在心肌细胞凋亡中的作用提供细胞模型。方法:将含有核仁素全长的质粒pCMV-Tag2B-Nuc用脂质体转染技术导入H9C2细胞,使核仁素在细胞内表达,用G418筛选出稳定表达核仁素的细胞株;用双酶切、DNA测序鉴定质粒,用RT-PCR及Western blot检测核仁素基因在靶细胞中的整合与表达。结果:经G418反复筛选的H9C2细胞株中,核仁素基因在mRNA及蛋白质水平表达均较野生型细胞及转空载体细胞升高。结论:用含核仁素全长的质粒转染H9C2大鼠心肌细胞,经筛选后可稳定表达核仁素。

• 单位
  长治医学院; 中南大学湘雅医学院; 长治医学院附属和平医院