TWIST1基因通过调节mTOR信号通路对口腔鳞癌Tca8113细胞增殖凋亡的影响

作者：程珏; 辛鹏飞; 程琳; 庄润涛; 刘志荣

来源：中国免疫学杂志, 2021, 37(12): 1434-1438.

• TWIST1
• 口腔鳞癌
• 自噬
• 增殖凋亡
• mTOR信号通路

目的:研究TWIST1基因对口腔鳞癌细胞增殖、凋亡的影响以及mTOR信号通路的调控作用。方法:构建shTWIST1质粒(sh-TWIST1)和阴性对照质粒(shRNA),利用Lipofectamine 3000转染试剂分别将构建好的两种质粒转染至口腔鳞癌Tca8113细胞中,以只加入转染试剂的Tca8113细胞作为空白对照(Control)。QRT-PCR法检测Tca8113细胞中TWIST1mRNA水平;CCK-8法检测TWIST1对Tca8113细胞活力的影响;Edu染色法检测TWIST1对Tca8113细胞增殖的影响;TUNEL染色法检测TWIST1对Tca8113细胞凋亡的影响;ELISA法检测TWIST1对Tca8113细胞中Beclin1、LC3水平的影响;Western blot法检测TWIST1对Tca8113细胞中p-mTOR和P-P70S6K蛋白表达情况的影响。结果:与阴性对照组和空白对照组相比,shTWIST1质粒组Tca8113细胞中TWIST1 mRNA水平下降,细胞活力和增殖能力明显提高,其凋亡能力随之下降;Tca8113细胞中Beclin1水平下降、LC3水平升高;且p-mTOR和P-P70S6K蛋白升高;而阴性对照组与空白对照组之间无差异。结论:TWIST1沉默后过度激活Tca8113细胞自噬反应,导致Tca8113细胞增殖,并抑制凋亡,其机制可能与激活mTOR信号通路有关。

• 单位
  北京交通大学