脊髓背角环磷酸腺苷直接激活的交换蛋白在大鼠炎性痛中的作用

作者：陈彬彬; 张一肖; 王振; 万海方^*

来源：浙江中西医结合杂志, 2022, 32(09): 811-815.

• 大鼠
• 脊髓背角
• 环磷酸腺苷直接激活的交换蛋白
• 炎性痛
• 弗氏完全佐剂

目的 探讨大鼠脊髓背角环磷酸腺苷直接激活的交换蛋白（Epac）在炎性痛调节过程中的作用。方法 清洁级健康成年雄性SD大鼠84只，3月龄，采用双侧后爪趾底皮下注射弗氏完全佐剂（CFA）100μL建立炎性痛模型。采用Western blot法于建模前及建模后1、3、6、9、14 d大鼠脊髓腰膨大检测Epacl、Epac2蛋白相对含量；采用免疫荧光法检测脊髓背角Epacl阳性细胞数。按随机数字表法分为三组：对照组（C组）、生理盐水组（NS组）和Epac激动剂8p-CPT-2′-O-Me-cAMP（8p-CPT）组，C组不做任何处理，NS组和8p-CPT组分别于建模后6 d，鞘内给予NS、8p-CPT 10μL。于建模前1 h、给药前1 h及给药后30 min、1 h、2 h和3 h测定热刺激缩足潜伏期（TWL），观察大鼠痛行为学变化；于给药后1 h采用免疫荧光法检测三组大鼠脊髓背角基因蛋白c-Fos阳性细胞数。结果 建模后3、6 d腰膨大脊髓Epacl蛋白相对含量明显低于建模前和建模后1 d [（0.74±0.09）、（0.77±0.08）比（1.00±0.00）、（0.99±0.07）,P<0.05],Epac2蛋白相对含量各时间点差异均无统计学意义（P>0.05）。建模后3、6、9、14 d脊髓背角Epac1阳性细胞数明显低于建模前[（34.25±4.99）个、（24.00±8.04）个、（31.50±3.51）个、（43.00±8.98）个比（61.75±4.99）个，P均<0.05]，建模后3、6、9 d脊髓背角Epac1阳性细胞数明显低于建模后1 d[（34.25±4.99）个、（24.00±8.04）个、（31.50±3.51）个比（58.00±5.35）个，P均<0.05]。给药前1 h及给药后30 min、1 h、2 h和3 h NS组和8p-CPT组TWL均明显低于C组[（6.8±1.0）s、（7.1±0.8）s比（13.3±1.6）s,（7.3±0.9）s、（9.2±1.0）s比（13.2±1.5）s,（6.9±1.2）s、（9.9±1.3）s比（13.9±1.8）s,（7.0±0.7）s、（8.7±1.2）s比（13.2±1.2）s,（7.0±0.9）s、（7.1±0.9）s比（13.2±1.4）s,P均<0.05]，给药后30 min、1 h和2 h 8p-CPT组TWL均明显高于NS组（P均<0.05）。给药后1 h NS组和8p-CPT组脊髓背角c-Fos阳性细胞数明显高于C组[（75.25±8.42）个、（40.50±6.81）个比（25.25±5.25）个，P均<0.05],8p-CPT组脊髓背角c-Fos阳性细胞数明显低于NS组（P<0.05）。结论 CFA诱导的慢性炎性痛可以降低脊髓背角Epac1蛋白含量，引起局部神经元异常激活，增强外周伤害性刺激应激反应。

• 单位
  杭州市红十字会医院