大肠杆菌核苷磷酸化酶的重组表达和活性

作者：谭黎; 欧阳立明; 丁庆豹; 欧伶

来源：华东理工大学学报, 2008, (05): 660-664.

DOI：10.14135/j.cnki.1006-3080.2008.05.003

• 大肠杆菌
• 嘌呤核苷磷酸化酶
• 尿苷磷酸化酶
• 胸苷磷酸化酶
• 表达 Escherichia coli
• pyrimidine nucleoside phosphorylase
• uridine phosphorylase
• thymidine phosphorylase
• expression

将大肠杆菌K-12菌株来源的嘌呤核苷磷酸化酶、尿苷磷酸化酶和胸苷磷酸化酶基因分别克隆到pET-11a载体并转化大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌表达,通过SDS-PAGE分析和酶的活性测定,重组菌诱导表达后目的蛋白的表达量占菌体总蛋白的37%以上,与产核苷磷酸化酶的野生菌比较,酶的活性也有显著提高。在特异反应条件下,构建的工程菌可以用来高效催化核苷的转糖基反应。