一种靶向CD152的复制缺陷性重组慢病毒CAR-T转基因载体及构建方法

作者:王依婷; 许姣姣; 康丽清; 张金芳; 徐南; 李明昊; 刘秧; 刘丽; 谭靖雯; 沈鸿伟; 骆声根; 闫志强; 王镜; 朱建中; 俞磊
来源:2019-03-01, 中国, ZL201910155779.7.

摘要

本发明公开了一种靶向CD152的复制缺陷性重组慢病毒CAR-T转基因载体及构建方法,其转基因载体包括:用以控制复制起始位点的启动子、用于质粒复制的原核复制子、用于增强真核细胞内的复制的病毒复制子、用于检测的抗性基因、病毒转录后的调控元件、用于慢病毒包装的包装顺式元件cis及用于识别、传递及启动的嵌合抗原受体CAR;所述复制缺陷性重组慢病毒CAR-T转基因载体的构建包括重组慢病毒质粒的构建、重组慢病毒载体的包装、浓缩及纯化,最终获得高纯度的靶向CD152的复制缺陷性重组慢病毒CAR-T转基因载体。本发明的重组慢病毒CAR-T转基因载体可显著提高细胞因子的分泌及对靶细胞CTLA-4的特异性杀伤,对于肿瘤微环境的抑制性和实体瘤的攻克提供新的治疗方向。