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摘要
目的 明确FATP5作为脂肪酸转运蛋白家族成员，其基因沉默对肝脏细胞脂肪化及炎症作用的影响，并初步探究该影响可能的机制。方法 设计合成5条shRNA序列，并借助siCHECKTM系统筛选得到FATP5有效干扰序列。将有效干扰序列包装成慢病毒后，通过细胞感染和嘌呤霉素筛选获得FATP5基因沉默HepG2细胞株。使用Western blot方法检测FATP5基因沉默的效率。之后，利用检测试剂盒、Western blot、核质分离及报告基因方法分别分析FATP5基因沉默细胞中油酸诱导ROS和MDA生成、TNF-α和IL-6蛋白表达与分泌，以及NF-κB活化的变化情况。结果 基因沉默细胞中FATP5蛋白表达水平下降90%,并且脂质蓄积作用也被显著抑制。此外，FATP5基因沉默可减少油酸诱导的ROS及MDA生成，同时还可降低NF-κB的转录活性，并下调其下游炎症因子TNF-α及IL-6的蛋白表达和分泌。结论FATP5基因沉默可减轻脂肪化肝脏细胞的炎症作用，其机制可能与抑制氧化应激和脂质过氧化作用有关。
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