PELP1激活Ras-Raf-MEK-ERK信号通路调控牙周膜干细胞成骨分化

作者：孙琼; 严妍; 刘彦^*

来源：中华老年口腔医学杂志, 2019, 17(05): 275-278.

DOI：10.19749/j.cn.cjgd.1672-2973.2019.05.005

• PELP1
• 牙周膜干细胞
• Ras-Raf-MEK-ERK信号通路
• 成骨分化

目的:探讨Ras-Raf-MEK-ERK信号通路在PELP1调控牙周膜干细胞(h PDLSCs)成骨分化过程中的变化。方法:通过单克隆法获得人源的牙周膜干细胞,分别将PEPL1过表达质粒pIRES2-EGFP-PELP1、PELP1 siRNA转染至牙周膜干细胞胞内48 h后,收集细胞,分别提取细胞的总RNA和总蛋白,运用qRT-PCR的方法检测胞内PELP1以及成骨相关指标Runx2、ALP和OCN的基因水平变化,运用western blot的方法检测Ras、p-c-Raf、c-Raf、p-MEK、MEK、p-ERK、ERK蛋白水平的变化。结果:与转染空载的对照组相比,转入PELP1过表达质粒的牙周膜干细胞胞内PELP1基因的表达量为对照组的3202倍,成骨相关基因Runx2、ALP和OCN的表达分别上调4. 69、2. 27和2. 28倍,其差异具有统计学差异(P<0. 01)。同样,与对照组相比,转入PELP1 siRNA后,牙周膜干细胞胞内PELP1的基因表达水平为对照组的0. 33倍,成骨相关基因Runx2、ALP和OCN的表达量分分别为对照组的0. 24、0. 44和0. 57倍,其差异具有显著统计学差异(P<0. 01)。蛋白印迹的结果显示,当牙周膜干细胞胞内PELP1基因过表达时,Ras表达水平升高的同时,Raf、MEK以及ERK被激活。抑制牙周膜干细胞胞内PELP1基因的表达时,Ras表达水平下降的同时Raf、MEK以及ERK被抑制。结论:PELP1激活Ras-Raf-MEK-ERK信号通路调控牙周膜干细胞成骨分化。

• 单位
  解放军第306医院