microRNA-22对调控软骨细胞自噬的影响及其在骨关节炎发病中的作用机制

作者：颜世举; 董文静; 李志锐; 赵燕鹏; 韩涛; 魏均强; 王俊良; 林峰^*

来源：武警医学, 2022, 33(11): 982-986.

DOI：10.14010/j.cnki.wjyx.2022.11.018

• microRNA-22
• 自噬
• 骨关节炎
• 软骨细胞

目的 探讨microRNA-22对软骨细胞自噬的影响及其在骨关节炎(OA)发病中作用机制。方法 原代培养人健康、OA软骨细胞，荧光定量PCR检测microRNA-22在健康、OA软骨细胞中的表达水平；Western blot检测健康、OA软骨细胞中自噬相关蛋白LC3B-Ⅱ、Ⅰ的表达水平；软骨细胞转染microRNA-22模拟物、抑制物，平板克隆形成实验检测microRNA-22对软骨细胞活性的影响，Western blot检测软骨细胞自噬相关蛋白LC3B-Ⅰ、LC3B-Ⅱ及Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)的表达水平。结果 荧光定量PCR检测结果显示，OA软骨细胞(14例)中microRNA-22表达含量(2.50±0.39)显著增高(P<0.01),约为健康软骨细胞(12例)(0.98±0.25)的2.5倍。Western blot检测结果显示，与健康软骨细胞相比，OA软骨细胞自噬相关蛋白LC3B的Ⅱ类亚型含量降低；OA软骨细胞(4例)LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值为1.25±0.13,健康软骨细胞(4例)LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值为1.85±0.21,差异具有统计学意义(P<0.01)。平板克隆形成实验检测结果显示，与空白对照组(107.33±14.3)相比，软骨细胞转染miR-22模拟物组细胞克隆形成数量(75.67±11.36)降低，软骨细胞转染miR-22抑制物组(128.5±9.95)增高，差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测结果显示：与空白对照组细胞相比，miR-22模拟物组软骨细胞中LC3B-Ⅱ含量降低(1.50±0.20),LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值降低(1.45±0.13),Ⅱ型胶原CollagenⅡ的表达水平降低(0.51±0.09);miR-22抑制物组软骨细胞中LC3B-Ⅱ含量增高(2.36±0.19),LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值增高(2.30±0.08),同时Ⅱ型胶原CollagenⅡ的表达水平增高(1.31±0.03),以上差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 microRNA-22抑制软骨细胞自噬，从而促进骨性关节炎的发生与进展。

• 单位
  解放军总医院