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摘要
目的 基于微小RNA(miR)-223/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)轴探讨柚皮素(NAR)对氧诱导视网膜病变(OIR)中小胶质细胞活化的影响。方法 150只7日龄(P7)C57BL/6J幼鼠分为常氧组、OIR组、NAR组、NAR+阴性对照组、NAR+miR-223拮抗剂组，每组30只。除常氧组外，其余各组幼鼠及其母鼠在P7～P12移至氧气体积分数(75±2)%封闭氧箱中，连续5 d, P12返回正常氧环境中；常氧组在正常氧环境中常规饲养。NAR组幼鼠腹腔注射100 mg/(kg·d) NAR,NAR+阴性对照组在NAR基础上P12尾静脉注射2.5 mg/kg miR-223拮抗剂阴性对照，NAR+miR-223拮抗剂组在NAR基础上P12尾静脉注射2.5 mg/kg miR-223拮抗剂，常氧组、OIR组每天腹腔注射等体积CMC、P12尾静脉注射等体积生理盐水。实时荧光定量PCR(RT-qRCR)检测视网膜中miR-223水平；幼鼠眼底行荧光素眼底血管造影(FFA);苏木精-伊红(HE)染色观察视网膜形态；免疫荧光检测视网膜中小胶质细胞标志物钙离子结合蛋白-1(Iba-1)情况；Western blot检测视网膜中NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、白细胞介素(IL)-1β及IL-18蛋白表达情况。结果 OIR组出现血管破裂，荧光漏在视网膜中，视网膜泛白，血管出现收缩，视网膜厚度变厚、细胞排列松散，部分出现细胞缺失现象、血管新生现象；NAR组、NAR+阴性对照组血管破裂现象缓解，视网膜泛白现象减轻，但视网膜细胞仍松散；NAR+miR-223拮抗剂组血管破裂，荧光漏在视网膜中，视网膜泛白明显，视网膜细胞松散严重、细胞缺失明显。与常氧组相比，OIR组视网膜中miR-223水平降低(P<0.05),视网膜中Iba-1水平、NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白水平升高(P<0.05);与OIR组相比，NAR组、NAR+阴性对照组视网膜中miR-223水平升高(P<0.05),视网膜中Iba-1水平、NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白水平降低(P<0.05);分别与NAR组、NAR+阴性对照组相比，NAR+miR-223拮抗剂组视网膜中miR-223水平降低(P<0.05),视网膜中Iba-1水平、NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白水平升高(P<0.05)。结论 NAR能够升高miR-223的表达进而抑制NLRP3炎症体的表达，从而缓解小胶质细胞过度活化现象，实现对OIR的缓解。
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单位郑州大学; 郑州儿童医院
