抗ATRX-C2193-2492多克隆抗体的制备和鉴定

作者：唐双阳; 刘志敏; 李冉辉; 陈艳; 赵兰华; 申海艳; 万艳平

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2017, 33(04): 536-545.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.008115

• X连锁的α地中海贫血/精神发育迟滞综合症(ATRX)
• 多克隆抗体
• 宫颈癌
• 表达

目的制备X连锁的α地中海贫血/精神发育迟滞综合症(ATRX)蛋白C端的多克隆抗体,分析ATRX蛋白在宫颈组织中的表达和定位。方法将纯化后的6His-ATRX-C2193-2492蛋白免疫BALB/c小鼠,获得抗血清;饱和硫酸铵盐析沉淀法以及亲和层析法纯化抗血清,制备抗ATRX-C2193-2492多克隆抗体。采用ELISA检测抗体效价;并用Western blot法鉴定其特异性;利用免疫组织化学技术检测宫颈癌组织细胞中ATRX的表达与定位。结果制备的ATRX-C2193-2492抗血清效价可达1∶12 800,该抗体能特异性识别ATRX-C2193-2492蛋白;并检测出在宫颈癌癌旁组织中ATRX具有较高表达并主要定位在细胞核,而在宫颈癌组织细胞中虽仍主要表达于细胞核,但表达量明显减少。结论成功制备了抗ATRX-C2193-2492多克隆抗体,能够应用于宫颈组织中的ATRX蛋白表达的检测。

• 单位
  南华大学; 南华大学附属第二医院