基因枪介导的转TaGAPDH8基因小麦的获得与鉴定

作者：雷代丽; 雷瑛彤; 张琳; 张阳璞; 邓西平; 杨淑慎^*

来源：麦类作物学报, 2019, 39(02): 133-139.

DOI：10.7606/j.issn.1009-1041.2019.02.02

• 小麦
• TaGAPDH8
• 基因枪
• qRT-PCR

甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)是参与糖酵解和糖异生途径的关键酶之一,在维持细胞能量供应和植物抗逆性方面具有重要作用。本研究以耐旱型小麦品种长武134及干旱敏感型小麦品种郑引1号为材料,利用基因枪法将 TaGAPDH8基因分别转化这两种小麦的幼胚愈伤组织,经潮霉素筛选和PCR鉴定,最终得到4个下调表达的长武134株系(CW134-3、CW134-6、CW134-12、CW134-13)和8个上调表达的郑引1号株系(ZY1-1、ZY1-3、ZY1-4、ZY1-9、ZY1-10、ZY1-14、ZY1-15、ZY1-17)。对生长于大田的T2代转基因植株在乳熟期的生长状况进行了测定,获得了与对照相比有明显表型差异的植株。用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术测定了T3代小麦株系中 TaGAPDH8的表达量,结果表明,4个长武134株系中 TaGAPDH8基因的表达量分别为对照的0.53、0.75、0.21和0.78倍,而8个郑引1号株系中目的基因的表达量分别为对照的3.02、1.22、2.15、1.36、4.02、1.87、1.48和1.97倍。本研究获得了与对照存在明显表型差异的T2代及稳定遗传目的基因的T3代小麦株系,为后续的试验提供了研究材料和基础。

• 单位
  西北农林科技大学; 生命科学学院; 中国科学院水利部水土保持研究所