基于微滴数字聚合酶链式反应定量检测木薯源成分

作者：刘二龙; 卢丽; 魏霜; 关丽军; 李志勇^*

来源：食品科技, 2020, 45(10): 279-283.

DOI：10.13684/j.cnki.spkj.2020.10.045

• 木薯
• 微滴数字PCR
• 定量
• 物种鉴定

根据木薯单拷贝木薯铜/锌超氧化物歧化酶(Manihotesculenta copper/zinc superoxide dismutase,mSOD2)基因序列设计特异性引物和探针,建立木薯成分微滴数字PCR定量检测方法,并测试了方法的特异性、灵敏度和适应性,并建立了拷贝数浓度(copies/μL)与木薯质量(mg)的线性关系。特异性测试表明,该方法特异于木薯成分检测,定量下限(limit of quantitation,LOQ)和检测下限(limit of detection,LOD)分别为1.67 copies/μL和0.28 copies/μL。对木薯质量百分比为5%和25%样本进行定量检测,检测结果经线性关系换算得到的木薯含量分别为5.77%和23.32%,回收率分别为115.40%和93.26%,相对标准偏差(RSD)为3.53%～4.19%。表明该方法具有良好的适用性,可对质量百分比为5%及以上木薯含量的样品进行准确定量。