犬细小病毒高效纳米PCR检测方法的建立及初步应用

作者：秦彤; 周灵; 由欣月; 梁琳; 史利军; 张建伟; 李金祥^*; 崔尚金^*

来源：畜牧兽医学报, 2019, 50(06): 1268-1274.

• 犬细小病毒
• VP2基因
• 纳米PCR
• 临床检测

为建立灵敏、快速的犬细小病毒(CPV)检测方法,本研究针对CPV VP2基因保守序列设计一对能扩增574 bp片段的特异性引物,对纳米PCR的退火温度、引物浓度等反应条件进行了优化,并对其特异性和灵敏度进行了评估。结果表明,所建立的纳米PCR特异性和灵敏性良好,最低核酸检出量为2拷贝·μL-1,其敏感性比常规PCR高1 000倍。分别采用纳米PCR和常规PCR,对广西、北京、吉林送检的75份疑似CPV的临床样品进行检测,CPV阳性率分别为89.3%(67/75)和70.7%(53/75),表明该方法具有更高的敏感性,适用于CPV低含量临床样品的检测。本方法的建立为CPV感染的早期快速、灵敏、准确的诊断提供了新方法,为CPV的防控奠定基础,具有重大的临床应用意义和价值。

• 单位
  农业部; 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所