四君子汤对HuR调控IEC-6细胞增殖及大鼠小肠黏膜损伤修复的影响

作者：涂小华; 杨欣; 徐萌萌; 杨光勇; 何光志; 钱海兵

来源：中药材, 2022, 45(09): 2210-2216.

DOI：10.13863/j.issn1001-4454.2022.09.032

• 四君子汤
• 肠黏膜损伤修复
• 细胞增殖
• HuR
• ATF-2
• JunD
• CDK4

目的：观察四君子汤对大鼠小肠黏膜HuR、ATF-2、JunD、CDK4蛋白表达及HuR调控IEC-6细胞增殖相关指标的影响，探讨其促进肠黏膜损伤修复的作用机制。方法：SD大鼠灌胃四君子汤水提液，采血制备四君子汤含药血清，体外实验设空白对照组、腐胺组、四君子汤含药血清组；α-二氟甲基鸟氨酸(DFMO)负荷实验加设DFMO组。Western Blot检测细胞HuR蛋白表达，RT-PCR法检测细胞ATF-2、JunD mRNA稳定性，RNA免疫共沉淀(RIP)检测细胞HuR结合ATF-2、JunD mRNA水平，免疫共沉淀(Co-IP)分析细胞ATF-2与JunD蛋白间相互作用。皮下注射吲哚美辛制备大鼠小肠黏膜损伤模型，Western Blot检测大鼠小肠黏膜HuR、ATF-2、JunD、CDK4蛋白表达。结果：体外实验结果显示，与正常对照组比较，四君子汤含药血清组细胞核HuR蛋白表达显著升高，细胞质HuR蛋白表达显著降低；模型组HuR蛋白在细胞质内表达显著升高，在细胞核中表达显著降低，HuR结合ATF-2、JunD mRNA表达及ATF-2、JunD mRNA稳定性和ATF-2/JunD蛋白复合物含量显著升高，四君子汤含药血清可逆转DFMO的上述作用(P<0.05)。动物实验结果表明，与模型组比较，四君子汤水提液(5、15 g/kg)组大鼠小肠黏膜HuR蛋白在细胞质中表达显著降低，在细胞核中表达显著升高，CDK4蛋白表达显著升高，ATF-2、JunD蛋白表达显著降低。结论：四君子汤可作用于多胺/HuR信号通路降低IEC-6细胞ATF-2及JunD mRNA稳定性及蛋白相互作用，同时可影响HuR调控大鼠小肠黏膜ATF-2、JunD及CDK4蛋白表达而促进肠黏膜损伤修复。

• 单位
  基础医学院; 贵州中医药大学