HIF-1α在七氟醚预处理减轻大鼠皮质神经元凋亡中的作用:与Slit2/Robo信号通路的关系

作者：孙文波; 张立民; 康立娜; 吴金光; 吕建敏; 黄冬冬; 孙秀伟

来源：中华麻醉学杂志, 2015, 35(05): 550-554.

• 缺氧诱导因子1,α亚基
• 麻醉药,吸入
• 细胞低氧
• 神经元
• 细胞凋亡
• 预处理

目的评价缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在七氟醚预处理减轻大鼠皮质神经元凋亡中的作用及其与Slit2/Robo信号通路的关系。方法新生SD大鼠,培养原代皮质神经元,以1×10~6/ml的细胞密度接种于6孔板(2 ml/孔)或96孔板(100μl/孔),采用随机数字表法,分为4组(n=24):正常对照组(C组)、缺氧复氧组(A/R组)、七氟醚预处理组(SP组)和HIF-1α抑制剂2-甲氧基雌二醇组(H组)。采用氧糖缺失90 min复氧复糖24 h的方法制备神经元缺氧复氧损伤模型;SP组通入2.0%七氟醚2 h,随后采用PBS洗涤3次,每次5 min,结束后立即进行缺氧复氧;H组加入5μmol/L2-甲氧基雌二醇孵育72 h时进行七氟醚预处理。采用膜联蛋白V,碘化丙啶双染流式细胞术检测细胞凋亡情况,采用比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出水平,分别采用免疫印迹法和实时定量荧光PCR法测定Slit2、Rob01和Rob04及其mRNA的表达水平。结果与C组比较,A/R组LDH漏出率和细胞凋亡率升高,Slit2和Robo1及其mRNA的表达上调(P<0.05),Rob04及其tuRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05);与A/R组比较,SP组和H组LDH漏出率和细胞凋亡率降低,SP组Slit2和Robo1及其tuRNA的表达上调(P<0.05),Rob04及其mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05);与SP组比较,H组LDH漏出率和细胞凋亡率升高,Slit2和Robol及其mRNA的表达下调(P<0.05)。结论HIF-1α介导了七氟醚预处理减轻大鼠皮质神经元凋亡的过程,其机制与激活Slit2/Robo1信号通路有关,而与Slit2/Robo4信号通路无关。

• 单位
  沧州市中心医院