运用基因枪法进行蛹虫草遗传转化的研究

作者：茅文俊; 鲍大鹏; 周陈力; 李燕; 谭琦; 汪滢

来源：园艺学报, 2015, 42(09): 1837-1842.

DOI：10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0145

• 蛹虫草
• 基因枪
• 遗传转化
• 绿色荧光蛋白

采用蛹虫草[Cordyceps militaris(L.)Link]野生型菌株CM01为供试材料,以金粉包裹质粒pDHt-gpd A-GFP-bar,运用基因枪法转化,经草铵膦抗性筛选,最终在靶距离6 cm或9 cm,氦气压力7.58×106 Pa或8.96×106 Pa条件下,获得2个遗传稳定的转化子Gfp2与Gfp3,转化效率为0.4 cfu·μg-1。PCR鉴定与Southern杂交分析显示,草铵膦抗性基因Bar已经以单拷贝或者多拷贝方式整合到蛹虫草转化子的基因组中。蛹虫草转化子的菌丝在荧光显微镜下可以观测到绿色荧光,表明载体携带的绿色荧光蛋白基因在蛹虫草转化子中得到表达。研究结果表明可以把基因枪法应用于真菌蛹虫草,建立了一种简便有效的遗传转化方法,而转化效率需要通过优化基因枪参数设置、受体材料制备等途径进一步提高。

• 单位
  上海市农业科学院食用菌研究所; 农业部