摘要
本研究旨在探讨Notch信号传导通路在VEGF促大鼠间充质干细胞增殖中的作用。体外培养大鼠间充质干细胞,取对数生长期的细胞用于实验研究。用Notch通路阻断剂DAPT阻断Notch信号传导,观察该通路在VEGF作用下大鼠间充质干细胞的增殖情况。实验分为4组:空白对照组、VEFG组、DAPT组及VEGF+DAPT组。应用CCK-8法检测各组细胞增殖情况,RT-PCR法检测各组相关基因(Notch1、Notch2、Flk-1、HES-1)mRNA水平的变化。结果表明,细胞培养3 d,各时间点(24 h,48 h,72 h)DAPT组及VEGF+DAPT组细胞存活率均较低,细胞形态变圆脱落,数目明显减少;VEGF组存活率最高,差异具有统计学意义(P<0.01);与对照组相比,VEGF组的Notch1、Notch2和Flk-1的表达水平均上调,而DAPT组及VEGF+DAPT组Notch1和Notch2的表达水平均下调,差异均具有统计学意义(P<0.05);VEGF组Hes-1基因水平下调,而DAPT组及VEGF+DAPT组Hes-1基因水平上调,差异具有统计学意义(P<0.05);DAPT组及VEGF+DAPT组的Flk-1基因表达水平稍有下调,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Notch信号通路在VEGF作用下对大鼠间充质干细胞的增殖具有明显促进作用,而DAPT可抑制这种增殖效应。
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单位广东医学院附属医院