基于MGC-803细胞微环境探讨加味小陷胸汤抑制侵袭迁移作用机制

作者：丁芮; 王景辉; 王靓; 陈建; 黄金玲^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2023, 29(01): 18-25.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20221625

• 微环境
• 加味小陷胸汤
• MGC-803细胞
• 胃癌
• 侵袭转移

目的：观察加味小陷胸汤水提取物对MGC-803细胞微环境的影响，探究该方通过调控MGC-803细胞微环境抑制侵袭迁移作用与其调控Wnt5a/Ca2+/活化T细胞核因子(NFAT)信号通路的可能机制。方法：转化生长因子-β1(TGF-β1)造模后，将MGC-803细胞分为空白组、模型组、加味小陷胸汤组(10、20、40 mg·L-1);Wnt5a过表达质粒转染后，分为过表达载体(pEX)-空白(NC)组、pEX-Wnt5a组、pEX-NC+加味小陷胸汤组(40 mg·L-1)和pEX-Wnt5a+加味小陷胸汤组(40 mg·L-1)。观察MGC-803细胞侵袭能力、迁移能力、微环境关键因子、上皮间质转化(EMT)基因、Wnt5a、钙调神经磷酸酶(CaN)、NFAT1、磷酸化(p)-NFAT1和NFAT1核蛋白表达及细胞Ca2+浓度变化。结果：与空白组比较，模型组微环境显著上调(P<0.01)；与模型组比较，加味小陷胸汤(10、20、40 mg·L-1)可明显抑制微环境(P<0.05,P<0.01)。进一步实验表明，与空白组比较，模型组过表达Wnt5a后侵袭细胞增多，划痕率升高，微环境因子和EMT基因呈活化态势，Wnt5a/Ca2+/NFAT通路激活(P<0.01)；与模型组比较，加味小陷胸汤可抑制细胞远处侵袭和减少愈合，抑制微环境、EMT发展，和Wnt5a/Ca2+/NFAT信号转导，降低NFAT1核表达和NFAT1介导的转录活性，从而降低细胞Ca2+浓度，且可逆转Wnt5a的作用(P<0.05,P<0.01)。结论：加味小陷胸汤可通过改善MGC-803细胞微环境调控Wnt5a/Ca2+/NFAT通路，抑制胃癌侵袭转移和EMT进程。

• 单位
  安徽省中医药科学院; 安徽中医药大学