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摘要
目的 探究雷帕霉素(Rapa)对大鼠尿道狭窄形成和成纤维细胞的影响及其作用机制。方法 构建大鼠尿道狭窄模型(SD雄性大鼠，体质量250～300 g),采用随机数字表法分为阴性对照组、阳性对照组和Rapa组，每组10只。术后14 d取大鼠尿道组织，行HE染色观察尿道组织形态学变化，Masson染色检测胶原变化；免疫组化法观察α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。将HLF-1细胞分为对照组，Rapa组和3-甲基腺嘌呤(3-MA)+Rapa组。应用transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力，流式细胞术检测细胞的周期和凋亡情况，Western blotting检测LC3的表达。结果 HE染色发现Rapa组大鼠尿道组织狭窄程度较阳性对照组明显减轻，Masson及免疫组化染色结果显示，阳性对照组和Rapa组大鼠损伤尿道组织中胶原和α-SMA表达均较阴性对照组大鼠增加，但Rapa组胶原和α-SMA表达显著低于阳性对照组。与对照组相比，Rapa组HLF-1细胞迁移、侵袭能力逐渐减弱，呈剂量依赖关系(均P<0.05),而加入3-MA干预后，Rapa对HLF-1迁移、侵袭和能力的抑制作用减弱(均P<0.05)。流式细胞术及Western blotting结果显示，与对照组相比，Rapa组细胞凋亡明显增加(均P<0.05),且细胞LC3表达呈剂量依赖性增多(均P<0.05)。结论 雷帕霉素可以缓解大鼠尿道组织损伤后纤维化，并抑制HLF-1细胞迁移和侵袭能力，诱导HLF-1细胞的凋亡，其效应可能是通过诱导细胞自噬来实现的。
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