摘要
为了分析林烟草(Nicotiana sylvestris)N’基因对烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)产生抗性的信号途径,培育抗TMV植物新品种,选取PAD4、EDS1、Rar1、Sgt1、NPR1、Jar6、COI1、CTR1作为候选基因。以林烟草总RNA为模板,通过反转录分别克隆上述8个基因的片段,通过添加酶切位点以及酶切、连接和转化,成功构建了上述8个信号蛋白的RNAi载体。酶切验证结果表明,所构建的8个RNAi载体的结构正确,可以用于进一步的遗传转化试验,这为分析N’基因对TMV产生抗性所依赖的信号途径奠定了基础。
-
单位中国农业科学院生物技术研究所; 草地农业科技学院; 兰州大学; 草地农业生态系统国家重点实验室