茶树叶片蛋白双向电泳体系建立与应用

作者：周琳; 申加枝; 段玉; 王婷; 王玉花; 朱旭君; 马媛春; 房婉萍^*

来源：亚热带植物科学, 2019, 48(03): 220-226.

• 茶树
• 叶片
• 蛋白双向电泳
• 体系建立
• 应用

为开展茶树Camellia sinensis低温和干旱胁迫下差异蛋白的分离和鉴定,以抗逆性较强的茶树品种‘迎霜’为试材,通过对提取方法、IPG胶条pH范围、上样量、分离胶浓度、染色方法的比较,筛选适用于茶树叶片的蛋白质双向电泳体系。结果表明,采用TCA-丙酮法或Tris-HCl法提取叶片总蛋白,选用17 cm pH 4～7IPG胶条用于等电聚焦,选择1.6～2.2 mg上样量、13.5%聚丙烯酰胺凝胶进行分离,随后通过高敏考马斯亮蓝R-250法染色;最终,叶片各分子量的蛋白充分分离,获得的双向电泳图谱分辨率高、背景清晰、重复性好,适用于‘迎霜’低温和干旱胁迫下叶片差异蛋白分析。

• 单位
  上海市农业科学院; 南京农业大学