新肠道病毒71型病毒样颗粒的制备

作者：李晓楠; 曹**; 李培锋

来源：中国免疫学杂志, 2012, (11): 1014-1018+1031.

• EV71
• Bac-to-Bac表达系统
• 病毒样颗粒 EV71
• Bac-to-Bac Baculovirus Expression System
• Virus-like particles

目的:研究新肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)的制备方法。方法:依据昆虫细胞偏爱密码子优化EV71 P1和EV71 3CD基因,将二者分别克隆至供体质粒pFastBac Dual多角体蛋白启动子pPh和pP10上;构建重组pFastBac Dual EV71 P1-3CD质粒,并与Bacmid质粒转座后,获得重组杆状病毒表达质粒转染至Sf9细胞,应用PCR、免疫荧光、SDS-Page和Western blot方法鉴定EV71 VLPs表达情况,最后利用蔗糖密度梯度离心的方法纯化EV71 VLPs。结果:经昆虫...

• 单位
  辽宁省动物疫病预防控制中心; 内蒙古农业大学; 中国农业大学