摘要
目的建立一种基于细胞计数试剂盒8(CCK-8)法的药物淋巴细胞刺激试验(DLST)并应用于急性药物性肝损伤(DILI)的诊断。方法筛选2011年1月-2014年12月北京佑安医院收治的急性DILI患者,收集导致肝损伤的可疑药物,分离外周血单个核细胞(PBMC),经体外培养后,与可疑药物共孵育,采用CCK-8法检测淋巴细胞的增殖程度。每次实验设阳性对照组,以植物血凝素进行刺激;同时以健康人的PBMC暴露于相同药物,同步检测作为阴性对照。将DLST结果引入RUCAM评分系统,评估对急性DILI诊断敏感性的影响。计数资料组间比较采用χ2检验。结果预实验确定了CCK-8法DLST的实验条件。共纳入61例急性DILI患者,其中52例75种药物完成了基于CCK-8法的DLST检测,48例70种药物结果可靠,共19例22种药物DLST阳性,患者和药物的阳性率分别为39.6%和31.4%,特异性为93.8%,38.2%(13/34)的中药和25.0%(9/36)的西药的DLST结果为阳性,刺激指数中位数为2.29(1.81~14.20)。将DLST结果引入RUCAM评分系统,可将评估结果为"极可能"和"很可能"的药物由74.7%提高至92.0%(χ2=8.112,P=0.004)。结论利用CCK-8法可进行DLST,将DLST结果引入RUCAM评分系统可显著提高对DILI诊断的敏感性。与经典DLST相比,这种基于CCK-8法的DLST实验室要求低,操作简便、快捷,且花费更低,可在临床进一步使用验证。
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单位首都医科大学附属北京佑安医院