N-乙酰-L-半胱氨酸通过AMPK/mTOR途径激活保护性自噬降低青蒿琥酯诱导的胰腺癌细胞死亡

作者：任自敬; 徐红霞; 李星阅; 王越; 马佳佳; 周佩洋^*

来源：西安交通大学学报（医学版）, 2022, 43(03): 354-360.

• 青蒿琥酯
• 胰腺癌
• 活性氧
• 自噬
• AMPK/mTOR

目的 使用活性氧(ROS)清除剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)探究青蒿琥酯（ART）对胰腺癌（PC）的抑制作用及机制。方法 ART干预3种PC细胞系CFPAC-1、Capan-2及BxPC3，通过CCK8法检测细胞活性；Transwell法检测细胞迁移能力；Western blotting检测迁移相关蛋白E钙黏蛋白（E-cadherin）、N钙黏蛋白（N-cadherin）及波形蛋白（Vimentin）的表达；ROS探针DCFH-DA检测胞内ROS；用LC3细胞免疫荧光检测胞内自噬小体的形成；加入NAC或自噬抑制剂3-MA后，再通过CCK8法检测细胞活性，Western blotting检测p-AMPK/AMPK、p-mTOR/mTOR、p62及LC3Ⅱ/Ⅰ的表达。结果 ART以时间、剂量依赖的方式抑制CFPAC-1、Capan-2的生长。200μmol/L ART处理CFPAC-1、Capan-2细胞48 h后，E-cadherin表达显著上调，N-cadherin及Vimentin显著下调，细胞迁移能力降低；ART上调胞内ROS水平，促进细胞自噬小体形成；NAC可逆转ART对CFPAC-1、Capan-2细胞的抑制效应，并上调p-AMPK/AMPK、p62、LC3Ⅱ/Ⅰ，下调p-mTOR/mTOR的表达，增强细胞自噬水平。3-MA不能逆转ART对PC细胞的抑制效应。结论 ART依赖ROS，而非自噬发挥抗胰腺癌效应。NAC通过AMPK/mTOR信号通路激活保护性自噬，削弱ART对PC细胞的抑制。

• 单位
  襄阳市第一人民医院; 湖北医药学院