猪RPL36A基因对PK15细胞增殖过程的影响

作者：王首元; 贠红梅; 史明月; 秦云梦; 李熊; 陈军舟; 周琛帛; 曹果清^*

来源：中国畜牧兽医, 2023, 50(08): 3035-3044.

DOI：10.16431/j.cnki.1671-7236.2023.08.001

• 猪
• RPL36A基因
• PK15细胞
• 过表达
• 干扰
• 细胞增殖

【目的】探究核糖体蛋白L36A(ribosomal protein L36A,RPL36A)基因对PK15细胞增殖过程的影响，为解析马身猪和大白猪生长速度差异的生理机制奠定基础。【方法】采用脂质体法将RPL36A基因干扰和过表达载体转染至PK15细胞中，通过实时荧光定量PCR和Western blotting技术检测RPL36A基因表达效率及细胞增殖标志基因(PCNA、Ki67、Cyclin B、CDK4)的表达变化，并通过划痕试验、CCK-8和EdU法检测细胞增殖情况。【结果】过表达RPL36A基因后，PK15细胞中PCNA、Ki67、CDK4基因mRNA表达量均极显著升高(P<0.01),Cyclin B基因mRNA表达量显著升高(P<0.05);PCNA蛋白表达量显著升高(P<0.05);PK15细胞在48 h的细胞数量极显著高于空载组(P<0.01),细胞增殖速度升高；阳性细胞数极显著升高(P<0.01)。干扰RPL36A基因后，PK15细胞中PCNA、Cyclin B基因mRNA表达量均极显著降低(P<0.01),Ki67、CDK4基因mRNA表达量均显著降低(P<0.05);PCNA蛋白表达量显著降低(P<0.05);PK15细胞在48 h的细胞数量显著低于对照组(P<0.05),细胞增殖速度降低；阳性细胞数极显著降低(P<0.01)。【结论】在PK15细胞中过表达和干扰RPL36A基因后，细胞增殖关键基因PCNA、Ki67、Cyclin B、CDK4的表达量及48 h的细胞数量和阳性细胞数均有显著变化，RPL36A基因可影响PK15细胞的增殖过程。

• 单位
  动物科学学院; 山西农业大学