摘要
[目的]本研究旨在探究神经营养因子酪氨酸激酶B受体(Trkb)对湖羊垂体促性腺激素分泌的影响。[方法]利用qPCR方法对Trkb进行组织表达谱分析;构建Trkb过表达载体并转染至湖羊垂体细胞,利用qPCR、Westernblot、EdU以及ELISA等实验技术检测过表达Trkb对垂体细胞增殖及促性腺激素分泌的影响。[结果]Trkb在湖羊心、肝、脾、肺、肾以及下丘脑和垂体等各个组织中均有表达,但在垂体中表达水平显著高于其他组织(P<0.05)。Trkb在湖羊垂体组织不同发育阶段差异表达,其中在6月龄垂体组织中高表达(P<0.05),在5日龄和3月龄表达水平较低。与对照组相比,过表达Trkb基因显著促进了垂体细胞增殖率(P<0.05),提高了Pcna与Bcl2/Bax比值的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05)。此外,过表达Trkb显著提高了促性腺激素相关基因 Fshb和Lhb的表达水平,促进了垂体细胞FSH分泌水平(P < 0.05)。[结论]过表达Trkb能够显著促进湖羊垂体细胞增殖,降低细胞凋亡水平从而显著提高促性腺激素的分泌水平。本研究初步验证Trkb在湖羊垂体细胞中功能,为深入研究Trkb调控垂体功能的分子机制提供了理论基础。
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单位动物科技学院; 南京农业大学