多重RT-PCR同时检测七种马铃薯病毒及类病毒

作者：邹莹; 杨立杰; 谢锦; 赵冀; 毕恒翊; 陈火云; 宋波涛; 马恢; 聂碧华^*

来源：植物保护, 2023, 1-10.

DOI：10.16688/j.zwbh.2022536

• 马铃薯
• 病毒
• 类病毒
• 检测方法
• 多重RT-PCR

病毒病是限制我国马铃薯生产的重要因子之一。本研究通过引物设计和体系优化建立了一套多重RT-PCR的检测方法，可以在一个反应体系中同时检测6种马铃薯病毒和1种马铃薯类病毒以及1个马铃薯内参基因，分别为马铃薯Y病毒(potato virus Y， PVY)、马铃薯M病毒(potato virus M， PVM)、马铃薯S病毒(potato virus S， PVS)、马铃薯X病毒(potato virus X， PVX)、马铃薯A病毒(potato virus A， PVA)、马铃薯卷叶病毒(potato leaf curl virus， PLRV)、马铃薯纺锤块茎类病毒(potato spindle tuber viroid， PSTVd)和细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ (cytochrome c oxidase subunit Ⅰ， CoxⅠ)基因的特异片段，产物大小依次为181、226、275、565、630、681、359、500 bp，符合理论预期；以相应病毒和类病毒的质粒作模板，该方法的检测灵敏度在1.6×10-3 ～1.8×10-1 ng/μL；用该方法检测田间未知样品，结果与DAS-ELISA检测结果高度相符，同时PVY、PVM、PVS、PVX 4种病毒的检出率高于DAS-ELISA，表明该方法准确可靠，可用于以上马铃薯主要病毒和类病毒的快速检测。

• 单位
  恩施土家族苗族自治州农业科学院; 张家口市农业科学院; 华中农业大学