摘要

目的 探讨微小RNA(miR)-21对胰腺癌细胞增殖、凋亡及有氧糖酵解的影响及其可能机制。方法 选取人胰腺癌细胞SW1990、正常胰腺导管上皮细胞HPDE为研究对象。对SW1990细胞进行转染,分为miR-NC组(转染miR-NC)、miR-21-mimic组(转染miR-21-mimic)。MTT、克隆形成实验检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡;RT-qPCR检测细胞中miR-21、M2型丙酮酸激酶(PKM2)基因mRNA表达水平;western blot检测PKM2蛋白水平;荧光素酶报告实验检测miR-21与PKM2的靶向关系。结果 SW1990细胞miR-21表达水平高于HPDE细胞(0.79±0.02 vs 0.23±0.02,t=34.290,P<0.01);SW1990细胞PKM2蛋白(0.41±0.03)、mRNA的表达水平(0.62±0.02)低于HPDE细胞(0.95±0.02、 1.13±0.03,t=25.940、24.500,P<0.01)。miR-21-mimic组72 h、96 h时细胞增殖能力、细胞克隆数明显高于miR-NC组,凋亡细胞数低于miR-NC组(P<0.05)。miR-21-mimic组细胞葡萄糖消耗量和乳酸、己糖激酶(HK)及乳酸脱氢酶(LDH)含量均明显高于miR-NC组(t=5.992、21.340、5.643、4.008,P<0.05)。miR-21-mimic组细胞PKM2蛋白表达水平低于miR-NC组(t=10.070,P<0.01)。miR-21与野生型-3′非翻译区(WT-3′UTR)-PKM2存在一定数量的互补碱基对,miR-21-mimic+WT-PKM2组的细胞荧光素酶活性低于miR-NC+WT-PKM2组(t=15.680,P<0.01)。结论 胰腺癌细胞miR-21高表达,miR-21过表达可能促进胰腺癌细胞增殖、有氧糖酵解,抑制细胞凋亡,其机制可能与靶向PKM2有关。

  • 单位
    新疆医科大学第二附属医院

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