大血藤ISSR-PCR反应体系的建立

作者：蔡琰琳; 金则新; 李钧敏

来源：江西农业大学学报, 2006, (04): 583-586.

• 大血藤
• ISSR
• 反应体系
• 优化 Sargentodoxa cuneata
• reaction system
• optimization

采用改进的SDS法抽提大血藤基因组DNA,分析了镁离子、dNTP、模板DNA含量、引物浓度、Taq DNA聚合酶量和BSA浓度对大血藤ISSR-PCR扩增结果的影响,建立了稳定的、可重复的大血藤ISSR最佳反应体系:10μL PCR反应体积中,4×Taq酶配套缓冲液(10 mmol/L Tris-HC l,pH9.0,50 mmol/L KC l,1 g/LTriton X-100),0.5U Taq DNA聚合酶,2 mmol/L MgC l2,0.1 mmol/L dNTP,12 pmol引物,10 ng模板DNA,2 mg/mL牛血清白蛋白。大血藤的最适退火温度为52.4℃。

• 单位
  台州学院; 杭州师范学院; 生命科学学院