猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白在昆虫杆状病毒表达系统中的表达与鉴定

作者：黄袁慧; 马静; 王乃迪; 张昕; 张莹; 兰冰洁; 刘玉良; 倪建强; 周智; 李义平; 王传彬

来源：中国动物传染病学报, 2022, 1-8.

DOI：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.20220513.002

• 猪繁殖与呼吸综合征病毒
• ORF5基因
• GP5蛋白
• 表达
• 蛋白纯化

猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）GP5蛋白是病毒主要囊膜结构蛋白和中和抗体主要靶蛋白，广泛应用于PRRS新型疫苗和诊断技术的研究。为获得具有与天然构象相近的PRRSV GP5蛋白，本研究根据草地贪夜蛾（Spdopterafrugiperda）密码子偏好性，优化PRRSV ORF5基因编码密码子，并克隆至杆状病毒载体后转染Sf9昆虫细胞，构建了重组杆状病毒rBac-PRRSV-GP5。经Western blot证实GP5蛋白在Sf9细胞中获得高效表达，且具有良好的免疫反应原性。经镍离子亲和层析纯化后，获得高纯度的重组GP5蛋白，为开展PRRSV诊断技术研发、生物学功能研究等奠定了抗原基础。

• 单位
  中山大学中山医学院; 广西大学; 动物科技学院; 中国动物疫病预防控制中心