PAX2慢病毒表达载体的制备及鉴定

作者：李里; 吴玉斌; 宫亮

来源：现代预防医学, 2013, (15): 2859-2862.

• PAX2基因
• 慢病毒载体
• 293T细胞 PAX2
• Lentiviral vector
• 293T cells

目的构建大鼠PAX2慢病毒表达载体,以期在大鼠肾脏中高效、稳定表达。方法设计引物引入AgeⅠ酶切位点,使用PCR方法从质粒pcDNA3.1-PAX2中扩增小鼠PAX2基因的编码区序列,对所扩增出的目的片段回收纯化。用In-Fusion技术将AgeⅠ内切酶消化后目的片段交换连接入AgeI酶切的pGC-FU载体,构建PAX2慢病毒表达载体pGC-FU-PAX2。酶切验证并测序正确后,将质粒pGC-FU-PAX2与慢病毒辅助包装载体共转染293T细胞,Western-blot验证PAX2在转染293T细胞中表达。结果通过PCR扩增获得了PAX2基因,将PAX2克隆到慢病毒转移质粒pGC-FU中,并在...

• 单位
  锦州医科大学; 中国医科大学附属盛京医院; 辽宁医学院附属第一医院