活性氧在氯化镉诱导的小鼠睾丸间质细胞凋亡中的作用

作者：易玲娜; 张玲; 熊传真; 张阳; 陈磊; 王一翔; 柳赟昊

来源：卫生研究, 2023, 52(01): 142-147.

DOI：10.19813/j.cnki.weishengyanjiu.2023.01.24

• 镉
• 小鼠睾丸间质细胞
• 活性氧
• 凋亡

目的 探究活性氧（reactive oxygen species, ROS）在氯化镉（cadmium chloride, CdCl2）诱导的睾丸间质细胞毒性中的潜在作用及机制。方法 以不同浓度CdCl2（0、5和10μmol/L）染毒小鼠睾丸间质TM3细胞24 h。CCK-8法检测CdCl2对TM3细胞活性的影响；Hoechst33342染色法检测凋亡小体；DCFH-DA探针法检测TM3细胞ROS水平；1 mmol/L N-乙酰半胱氨酸（N-acetyl-L-cysteine, NAC）预处理1 h后用10μmol/L CdCl2染毒TM3细胞24 h, Western blot检测细胞内促凋亡蛋白Caspase-9和cleaved Caspase-3的表达水平；RT-qPCR检测细胞内抗凋亡基因Bcl-2以及促凋亡基因Caspase-9和Caspase-3 mRNA表达水平。结果 CdCl2染毒细胞24 h后，TM3细胞活力降低且凋亡小体数量增加。10μmol/L CdCl2染毒组细胞Caspase-9蛋白表达水平为0.86±0.10,较对照组（0.56±0.07）升高（P2染毒组细胞cleaved Caspase-3蛋白表达水平分别为0.65±0.03和1.05±0.13,较对照组（0.37±0.11）升高（P2染毒组细胞内ROS含量分别为60.47±1.39和80.63±1.34,亦较对照组（46.80±1.24）增加（P2组：0.89±0.07;CdCl2+NAC组：0.28±0.02）和cleaved Caspase-3（CdCl2组：1.53±0.21;CdCl2+NAC组：0.66±0.07）蛋白的表达，差异有统计学意义（P2+NAC组ROS水平（62.64±0.93）也较CdCl2染毒组（80.13±0.94）降低（P2染毒组细胞Caspase-9 mRNA水平与对照组（0.97±0.10）相比分别升高为1.40±0.14和1.90±0.12（P2+NAC组镉诱导的Bcl-2 mRNA表达水平显著改善（0.92±0.03）,Caspase-9（CdCl2组：1.96±0.07;CdCl2+NAC组：1.04±0.02）和Caspase-3（CdCl2组：1.65±0.02;CdCl2+NAC组：0.66±0.04）的表达水平降低（P2诱导的过量ROS激活，抑制ROS可显著降低CdCl2诱导的TM3细胞凋亡。

• 单位
  武汉科技大学; 公共卫生学院