衰老SH-SY5Y细胞氧糖剥夺/再灌注模型的建立

作者：张巧添; 蒋嫦月; 诸葛详真; 李德丽; 胡婉湘; 谢露^*

来源：海南医学院学报, 2023, 29(06): 401-407.

DOI：10.13210/j.cnki.jhmu.20230106.001

• 脑缺血再灌注损伤
• 氧糖剥夺/再灌注
• 衰老
• D-半乳糖
• SH-SY5Y细胞

目的：探讨衰老SH-SY5Y细胞氧糖剥夺/再灌注模型的建立。方法：将SH-SY5Y细胞随机分为对照(D-半乳糖0 mmol/L)、D-半乳糖(25 mmol/L、50 mmol/L、100 mmol/L、200 mmol/L、400 mmol/L)组，分别给予对应浓度的D-半乳糖处理48 h，显微镜观察细胞形态的改变、β-半乳糖苷酶试剂盒检测β-半乳糖苷酶活性、EdU试剂盒检测细胞增殖率以及CCK-8法检测细胞存活率，确定D-半乳糖致衰浓度，建立衰老模型。将衰老SH-SY5Y细胞随机分为对照(氧糖剥夺不处理)、氧糖剥夺处理(0.5 h、1 h、1.5 h、2 h)组，随后复糖复氧24 h,CCK-8检测衰老SH-SY5Y细胞存活率。结果：25 mmol/L、50 mmol/L组的细胞形态、β-gal活性与对照组比较没有明显变化(P>0.05),100 mmol/L组细胞可见胞体肥大，200 mmol/L组细胞染色质固缩，400 mmol/L组细胞出现大量空泡化；(100 mmol/L～400 mmol/L)组细胞β-半乳糖苷酶染色阳性率与对照组比明显升高(P<0.05),100 mmol/L、200 mmol/L组间差异不大(P>0.05);(100 mmol/L～400mmol/L)组细胞增殖能力明显下降，呈浓度依赖性降低(P<0.05)；细胞存活率呈浓度依赖性降低(P<0.05),IC50在100 mmol/L和200 mmol/L之间。衰老SH-SY5Y细胞存活率呈氧糖剥夺时间依赖性降低(P<0.05),IC50接近1 h。结论：D-半乳糖浓度为100 mmoL/L且作用细胞48 h，可建立存活率约50%的衰老SH-SY5Y细胞模型，氧糖剥夺衰老SH-SY5Y细胞1 h再灌注24 h可建立存活率接近50%的衰老SH-SY5Y细胞氧糖剥夺/再灌注模型。

• 单位
  广西医科大学; 南宁市第四人民医院