WSSV和IHHNV对虾病毒的胶体金免疫层析快速检测

作者：丁东; 熊云; 方勇新; 林标扬

来源：水产养殖, 2014, 35(10): 1-7.

• 对虾
• 白斑综合征病毒
• 传染性皮下和造血器官坏死病毒
• PCR
• 胶体金免疫赏析
• 同步检测

为了快速、方便地检测出这2种病毒,研究将PCR核酸扩增的高灵敏度和胶体金免疫层析技术快速、简便、直观的优点结合起来,建立了同时检测2种对虾病毒(WSSV和IHHNV)的同步PCR-胶体金免疫层析检测方法。采用了生物素标记和地高辛(Digoxigenin)标记引物。PCR扩增产物利用胶体金免疫层析技术进行检测。胶体金免疫检测试剂条的检测线(T线)处的层析膜处点上地高辛的单抗,经地高辛标记的PCR扩增产物可在T线上被检测到,在10 min内即可得到检测结果。同时,在PCR过程中使用UNG(尿嘧啶-DNA糖基酶),极大地控制了遗留污染。通过此方法检测对虾WSSV和IHHNV病毒的灵敏度均可达到10100个拷贝,高于国家标准PCR检测法10100倍。此检测方法让工作人员避免了接触有毒和诱导突变的试剂,免除基层检测实验室购买电泳设备和荧光检测系统的投资。

• 单位
  浙江大学; 杭州普望生物技术有限公司