摘要

目的 建立一种新液质联用方法检测肿瘤微环境中旁分泌型低丰度蛋白。方法 用丙酮提取C57/B6小鼠皮下脂肪原代细胞培养基中的蛋白质,通过四维-高场非对称波形离子迁移谱-静电场轨道阱线性离子阱模式(4D-Faims-OTIT),电子转移裂解-静电场轨道阱线性离子阱模式(ETD-OTIT)和静电场轨道阱线性离子阱模式(OTIT)三种液质联用模式分析。结果 S1样本4D-Faims-OTIT,OTIT和ETD的蛋白鉴定数分别为1040±21,428±4和274±6,S2样本分别为851±31,290±10和192±14。S1中修饰位点分别为138±12,105±1和75±14,S2中分别为122±15,66±15和42±7。4D-Faims-OTIT在S1中鉴定到分泌型蛋白为结肠癌(GDF15)、肺癌(CXCL12)、胰腺癌(Cathepsin D/B)、卵巢癌(Insulin-like growth factor)、肝癌(Apolipoprotein E/Cystatin C)。结论 4D-Faims-OTIT可显著提高肿瘤微环境中脂肪细胞分泌型蛋白组的检测灵敏度,有助于结直肠癌、肺癌和卵巢癌等疾病机理的研究。