摘要

目的研究微小RNA(miR)-513a-3p调控己糖激酶2(HK2)对结直肠癌细胞增殖和糖代谢的影响。方法 2019年5月至2020年2月分别用miR-513a-3p模拟物、miR-513a-3p抑制物和miR对照物转染结直肠癌SW480细胞, 采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-513a-3p在结直肠癌SW480细胞、正常结直肠细胞及各结直肠癌SW480细胞转染后的表达水平;CCK-8法检测miR-513a-3p对细胞增殖的影响;Brd/PI掺入实验检测miR-513a-3p对糖代谢的影响;蛋白质印迹法检测HK2表达水平。结果结直肠癌SW480细胞miR-513a-3p表达水平明显低于正常结直肠细胞(0.43 ± 0.06比1.00 ± 0.02), 差异有统计学意义(t = 7.024, P = 0.003)。结直肠癌SW480细胞转染miR-513a-3p模拟物后miR-513a-3p表达水平明显高于转染miR对照物和转染miR-513a-3p抑制物(1.18 ± 0.24比0.45 ± 0.04和0.22 ± 0.03), 转染miR对照物后miR-513a-3p表达水平明显高于转染miR-513a-3p抑制物, 差异均有统计学意义(P<0.05)。结直肠癌SW480细胞转染miR-513a-3p模拟物24、48、72和96 h细胞增殖能力明显低于转染miR对照物, 转染miR-513a-3p抑制物24、48、72和96 h细胞增殖能力明显高于转染miR对照物, 差异均有统计学意义(P<0.05)。结直肠癌SW480细胞转染miR-513a-3p模拟物后葡萄糖摄取量及乳酸和硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)表达水平明显低于转染miR对照物(1.02 ± 0.04比1.90 ± 0.06、0.88 ± 0.03比1.45 ± 0.04和0.16 ± 0.02比0.86 ± 0.06), 转染miR-513a-3p抑制物后葡萄糖摄取量及乳酸和TXNIP表达水平明显高于转染miR对照物(2.35 ± 0.09比1.90 ± 0.06、1.67 ± 0.08比1.45 ± 0.04和2.01 ± 0.15比0.86 ± 0.06), 差异均有统计学意义(P<0.05)。结直肠癌SW480细胞转染miR-513a-3p模拟物后HK2表达水平明显低于转染miR对照物(0.20 ± 0.01比1.02 ± 0.04), 差异有统计学意义(t = 8.367, P<0.05);转染miR-513a-3p抑制物后HK2表达水平明显高于转染miR对照物(1.91 ± 0.07比1.02 ± 0.04), 差异有统计学意义(t = 4.279, P<0.05)。结论 miR-513a-3p对于结直肠癌细胞的增殖和糖代谢有明显的抑制作用, 并且其调控机制与miR-513a-3p抑制细胞中HK2蛋白的表达有关。

  • 单位
    湖南中医药大学第一附属医院