王棕花粉过敏原基因的克隆表达、纯化及免疫学鉴定

作者:姚敏; 孟光; 刘志刚; 邬玉兰; 张红云
来源:中华微生物学和免疫学杂志, 2007, (11): 1054-1058.
DOI:10.3760/j.issn:0254-5101.2007.11.025

摘要

目的 克隆并表达王棕花粉中泛变应原肌动蛋白抑制蛋白(profilin).方法 利用RT-PCR结合RACE技术克隆王棕花粉中泛变应原profilin的全长基因,并进行序列分析.然后设计带有酶切位点的特异性引物,采用RT-PCR获得整个王棕花粉profilin的开放阅读框,将其与pET28a载体连接并转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,通过Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,采用

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