苦瓜MAP30蛋白基因克隆、表达及其抗肿瘤活性研究

作者：林育泉; 周鹏; 曾召绵

来源：中国生物工程杂志, 2005, (5): 60-66.

DOI：10.3969/j.issn.1671-8135.2005.05.013

• MAP30
• 克隆
• 表达
• 纯化
• 活性分析

通过PCR技术,从苦瓜总DNA中扩增出编码MAP30成熟蛋白的基因,经测序鉴定后亚克隆到原核表达载体pET-30a中,构建成带有N端6His-tag的融合表达载体.表达载体用CaCl2介导的化学转化法转化E.coli BL21(DE3),然后利用PCR筛选阳性克隆.工程菌经1mmol/L IPTG诱导4h实现高效表达,而且在30℃时融合蛋白表达量最高,约占菌体总蛋白56%.可溶性分析表明,该融合

• 单位
  药物研究所; 中国热带农业科学院热带生物技术研究所