小鼠胚胎电转外源物质条件的优化

作者：樊英智; 邬明丽; 李世鹏; 高源; 赖振雨; 雷初朝; 党瑞华^*

来源：西北农业学报, 2018, 27(11): 1591-1597.

• 电转染
• 转基因
• 早期胚胎
• 小鼠

旨在优化电转外源物质进入小鼠胚胎的条件,为电转CRISPR/Cas9系统进入小鼠胚胎进行基因编辑奠定基础。在不同的电转条件下分别将四甲基罗丹明标记的葡聚糖(Tetramethylrhodamine-labelled dextran)、带绿色荧光蛋白标记的质粒pLL3.7和体外转录的绿色荧光蛋白mRNA导入小鼠胚胎细胞,并进行培养,在荧光显微镜下观察胚胎发育状态,分析荧光染料进入胚胎及绿色荧光蛋白的表达情况。结果表明,高电压使胚胎成活率显著下降,低电压使电转效率显著下降。最适电压是110V,且小鼠胚胎2细胞期较1细胞期更适合电转。

• 单位
  动物科技学院; 西北农林科技大学