C2C12-GLUT4HA骨骼肌细胞株的筛选

作者：仇利红; 高静; 牛文彦

来源：天津医药, 2013, 41(06): 580-582.

• 肌骨骼
• 葡萄糖转运体型
• 细胞培养的
• 胰岛素
• 肌收缩
• 电脉冲刺激

目的筛选过表达带有HA表位的葡萄糖转运子4(GLUT4HA)且具有收缩能力的C2C12骨骼肌细胞株。方法建立稳定过表达GLUT4HA的C2C12骨骼肌细胞株,从中挑选出23个克隆。用光镜观察各个克隆分化为多核肌管的能力和响应电脉冲刺激(EPS)的收缩能力,并用免疫印迹法检测各克隆中GLUT4HA蛋白的表达水平,筛选出分化良好、响应EPS收缩且高表达GLUT4HA的细胞株。将各细胞株进一步分为胰岛素组及其对照组、EPS组及其对照组,用酶联免疫吸附(ELISA)法测定各组细胞膜上GLUT4HA的含量(转位)。结果在选出的23个克隆中,克隆17的GLUT4HA表达量较高,分化和收缩能力良好,且在胰岛素和EPS后GLUT4转位显著升高。结论本研究建立了过表达GLUT4HA的具有收缩能力的C2C12-GLUT4HA骨骼肌细胞株,可用于研究胰岛素调节GLUT4转位和收缩调节GLUT4转位的机制。

• 单位
  天津医科大学; 天津中医药大学第一附属医院