摘要
附睾是精子运输、成熟和储存的主要场所,其结构、功能及基因表达高度依赖雄激素/雄激素受体(androgen receptor, AR)调控。AR在多种动物附睾高表达,调控附睾上皮和管腔液的功能,对于精子成熟具有重要意义。为探究AR在出生后从江香猪(Sus scrofa)附睾中的表达特征,本研究利用qRT-PCR、免疫组化和Western blot技术检测AR在从江香猪初情期前(15 d)、初情期(30 d)、初情期后(60 d)和性成熟期(180 d)四个关键时期附睾组织的表达变化。qRT-PCR结果显示,AR基因在15、30、60和180 d从江香猪附睾组织均有表达,且伴随日龄的增加而增高,在180 d表达最高;在不同区段中,AR基因在Ⅳ区(附睾尾)表达最高、Ⅰ区(附睾头)表达量最少(P<0.05);除Ⅰ区与Ⅲ区(附睾体)表达差异不显著外,其余区段间均呈显著差异(P<0.05)。Western blot结果显示,AR在不同日龄及附睾5个区段中的蛋白表达丰度与mRNA水平呈现一致的变化趋势。免疫组化染色也呈现一致的变化趋势,AR主要定位于附睾上皮细胞的细胞核及精子上,并呈现附睾区段差异表达模式。总之,本研究发现AR的表达从15 d增强至60 d,并维持高表达至180 d,主要分布于附睾上皮细胞的细胞核和精子,表明附睾AR表达呈阶段特异性和区段特异性;此外,AR在180 d的高表达可能与该时期附睾内存在大量精子有关。本研究为深入探讨从江香猪附睾内精子成熟机制提供参考依据。
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单位动物科学学院; 贵州大学