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摘要
目的 通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法建立快速鉴别石菖蒲药材及饮片掺混藏菖蒲的方法。方法 对石菖蒲和藏菖蒲的核糖体DNA内转录间隔区（ITS）序列酶切位点进行比对分析，选择藏菖蒲的特异性酶切位点AluI，设计PCR-RFLP反应引物，对影响PCR-RFLP反应的退火温度、引物浓度、循环数、酶切时间等条件进行优化，对该方法的准确性进行考察。利用建立的PCR-RFLP鉴别方法对不同产地的石菖蒲、藏菖蒲及掺混样品进行适用性考察。结果 建立了石菖蒲药材及饮片掺混藏菖蒲的PCR-RFLP鉴别方法，在退火温度60℃、循环数为30时，藏菖蒲或掺有藏菖蒲的石菖蒲样品经过特异性引物扩增后，能被AluI酶酶切，在100～300 bp检出2条单一DNA条带，石菖蒲样品则无此条带。该方法能对石菖蒲药材及饮片中掺混的藏菖蒲进行准确鉴别，并对石菖蒲中掺入藏菖蒲的检出限为3%。结论 建立的PCR-RFLP鉴别方法稳定性好、灵敏度高，可用于石菖蒲与藏菖蒲鉴别及石菖蒲中掺混藏菖蒲的检测，为石菖蒲与藏菖蒲药材的质量控制提供参考。
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