摘要

目的:建立不同产区浙贝母的叶绿体rbcL基因的PCR扩增体系,并对产区间的序列差异进行分析。方法:将采集于27处不同产地的浙贝母鉴定、切碎、打粉后保存备用。总DNA提取方法采用试剂盒法,PCR扩增体系主要考察退火温度、Taq酶浓度、Mg2+、dNTP浓度等因素。基因序列分析采用Conting Express和DNAman软件。结果:50μL反应体系中含Taq酶1 U,2.5 mmol/L Mg2+、dNTP分别为2μL,退火温度为52℃。浙贝母rbcL序列全长599 bp,G+C含量为50.7%,浙贝母不同产区rbcL序列未发现突变位点。结论:所建立的体系可用于浙贝母rbcL序列分析,为浙贝母的rbcL序列研究奠定基础。研究结果提示rbcL序列在浙贝母种间或者产地间的分辨率较低,不适合作为浙贝母种间和产地间的鉴别方法。