基因2型牛病毒性腹泻病毒河南株分离鉴定及全基因序列分析

作者：王倩颖; 王廷龙; 刘可欣; 刘俊峰; 胡建军; 程世鹏; 张淑琴^*

来源：中国动物传染病学报, 2023, 31(04): 120-130.

DOI：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.2023.04.009

• 牛病毒性腹泻病毒2型
• 全基因测序
• 直接免疫荧光法
• 电镜观察

河南某地区牛场部分牛出现呼吸道症状，伴随有怀孕母牛的流产，本研究使用细胞培养的方法于病死牛脾脏中分离得到1株BVDV病毒，命名为BVDV-HEN01。该病毒在MDBK细胞上生长，未发生固缩、拉网等病变，可确定该毒株为1株非致细胞病变毒株；下载若干条BVDV全基因序列，经MegaAlign软件比对在同源性较高的区域设计全基因组扩增引物10对，经鉴定该毒株为BVDV-2型毒株，并扩增出该毒株的全基因组；直接免疫荧光法测得病毒TCID50为10-4.1/0.1 mL。使用电镜观察病毒颗粒，颗粒的直径为50 nm左右。对分离株进行同源性分析并绘制系统进化树，发现HEN01株与我国SD1301株进化关系密切。本实验所分离的毒株为1株新的BVDV-2b亚型毒株，全基因组序列测定的完成对于反向遗传工程与疫苗的研发有重大意义。

• 单位
  中国农业科学院特产研究所; 动物科学学院; 塔里木大学