重组人脑利钠肽等电点分析全柱成像毛细管等电聚焦电泳法的建立及验证

作者：张竞; 周志艳; 李丹丹; 安丽康; 王岩勃; 邹卫^*

来源：中国生物制品学杂志, 2023, 36(05): 599-613.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.003894

• 重组人脑利钠肽
• 等电点
• 全柱成像毛细管等电聚焦电泳
• 优化
• 验证

目的 建立重组人脑利钠肽等电点（isoelectric point,pI）分析的全柱成像毛细管等电聚焦电泳（capillary isoelectric focusing-whole column imaging detection,CIEF-WCID）法，并进行验证。方法 采用CIEF-WCID法对两性电解质、占位剂、蛋白浓度、聚焦时间等进行优化后，获得检测重组人脑利钠肽的最佳检测条件。对建立的方法进行重复性、样品间精密度和耐用性验证，并对连续生产的3批重组人脑利钠肽进行pI分析。结果 选择HR AESlyte 8-10.5为两性电解质，25 mmol/L氢氧化钠为占位剂，以87.5μg/mL为样品检测终浓度，聚焦时间为8 min。同一样品连续进样6次，检测pI相对标准偏差（RSD）为0.1%;6份样品检测pI RSD为0.1%；在样品不同终浓度下，主峰pI RSD为0.1%，不同放置时间下，样品pI RSD为0.1%，但pI标记物不可随意更改。连续3批重组人脑利钠肽样品pI均可检出。结论建立的重组人脑利钠肽pI分析的CIEF-WCID法，重复性好、精密度高，可用于重组人脑利钠肽后续的质量控制。

• 单位
  河北科技大学; 石家庄沃泰生物科技有限公司