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摘要
目的采用EST-SSR标记遗传多样性能研究。方法以青叶胆叶片为材料,采用改良CTAB法提取DNA,通过单因素筛选法及L16(45)正交试验对模板DNA、d NTPs、引物、Taq酶及Mg~(2+) 5个因素进行优化试验。结果最佳反应体系为(20μl):50 ng模板DNA,150μmol/L d NTPs,0.1μmol/L引物,1.5 U Taq酶,2.5μmol/L Mg2+。从52对引物中初步筛选出10对条带清晰、多态性好的引物。结论本实验获得的优化体系能稳定用于青叶胆EST-SSR分子标记,为遗传多样性、亲缘关系分析及遗传作图等研究工作奠定了重要基础。
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单位云南中医药大学; 云南省农业科学院药用植物研究所
