己糖对杜兴肌肉萎缩症核酸药物Pip5e-PMO跳读活性研究

作者：宁含含; 顾犇; 韩刚; 林曹瑞; 尹海芳^*

来源：天津医科大学学报, 2019, 25(03): 215-219.

• 杜兴肌肉萎缩症
• 外显子跳读
• 己糖
• 肽修饰PMO
• 抗肌萎缩蛋白

目的:在杜兴肌肉萎缩症模型上探究己糖混合物对核酸药物Pip5e-PMO介导的外显子跳读活性的促进作用。方法:选择成年mdx小鼠为测试动物模型,通过局部肌肉和系统尾静脉注射,比较Pip5e-PMO与己糖和生理盐水联用的作用效果,利用免疫荧光(IHC)和蛋白印迹法(Western blot)检测dystrophin阳性肌纤维的数量和分布及dystrophin蛋白的表达水平;利用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测外显子跳读。结果:在局部肌肉给药试验中,己糖能够促进Pip5e-PMO诱导dystrophin蛋白表达水平(P<0.05)。在系统试验中,对己糖和生理盐水组比较发现:按15 mg/kg的剂量单次系统尾静脉注射Pip5e-PMO,骨骼肌中dystrophin蛋白表达恢复至正常水平的50%;在心脏中,也检测到明显的dystrophin恢复表达和外显子跳读。但两组无显著性差别(P>0.05)。结论:Pip5e-PMO可诱导有效的外显子跳读和dystrophin蛋白表达,但己糖对其促进效果有限。

• 单位
  天津医科大学; 基础医学院