炙甘草来源的sRNA可能通过靶向TNF-α缓解轻度ADRS模型小鼠的肺损伤

作者：姜振宇; 王小娜; 汤克功; 陈明锐; 蒋澄宇^*

来源：基础医学与临床, 2023, 43(07): 1030-1039.

DOI：10.16352/j.issn.1001-6325.2023.07.1030

• 急性呼吸窘迫综合征
• 急性肺损伤
• 小RNA
• TNF-α
• 四逆汤

目的 探索靶向TNF-α的小RNA(sRNA)在急性呼吸窘迫综合征(ARDS)中的影响和作用机制。方法 以TNF-α为靶点，通过生物信息学方法从四逆汤水煎液sRNA数据库中筛选sRNAs;用双荧光素酶报告基因系统验证sRNAs靶向TNF-α的效果；将sRNA转染进细胞中，通过ELISA检测脂多糖(LPS)或poly(I:C)刺激的人肺腺癌细胞系A549的炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-α;通过RT-qPCR检测LPS或poly(I:C)刺激的A549细胞炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA水平；用LPS或poly(I:C)气管滴注构建小鼠轻度ARDS模型，将小鼠分为native组、模型组、NC组和sRNA治疗组，通过ELISA检测小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)和血清中炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-α的浓度；观察轻度ARDS模型小鼠存活情况，统计分析小鼠的存活率。结果 生物信息学分析筛选出50条可能与TNF-α mRNA结合的sRNA;双荧光素酶报告基因系统和人单核细胞白血病细胞系(THP1)炎性细胞模型筛选出1条能靶向TNF-α的TNF-α-sRNA-9,这条sRNA来源于四逆汤中的炙甘草；与NC组相比，TNF-α-sRNA-9降低了LPS或poly(I:C)刺激的A549细胞炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-α水平(P<0.05),降低了mRNA水平(P<0.05);与NC组相比，TNF-α-sRNA-9的治疗降低了轻度ARDS模型小鼠的支气管肺泡灌洗液和血清中的IL-1β、IL-6和TNF-α水平(P<0.05),增加了小鼠的生存率。结论 TNF-α-sRNA-9可能通过靶向TNF-α缓解轻度ARDS模型小鼠的肺损伤。

• 单位
  中国医学科学院基础医学研究所; 北京协和医学院