致病疫霉酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定

作者：陈泓妃; 顾赛汝; 王洪洋; 李灿辉; 刘晶^*

来源：江苏农业科学, 2023, 51(13): 60-64.

DOI：10.15889/j.issn.1002-1302.2023.13.009

• 致病疫霉
• 马铃薯
• 酵母双杂交
• cDNA文库

致病疫霉是引起马铃薯晚疫病的重要病原菌，在全世界范围内造成了严重的经济损失。以2种不同致病力的致病疫霉菌株侵染马铃薯叶片5个时间点的混合菌丝样品作为cDNA文库的材料来源，利用Gateway法分别构建了初级文库与次级文库，初级文库与次级文库的库容量分别为1.60×107、1.52×107 CFU,插入片段长度大多在1 000～2 000 bp之间，重组率均达到100%。次级文库质粒转化酵母菌构建酵母文库，所得酵母文库滴度为1.00×108 CFU/mL,转化效率为6×108 CFU/μg。结果表明，本研究构建的酵母双杂交cDNA文库质量较高，完全可以满足互作蛋白高质量、高效率筛选的要求。该文库为后续深入解析致病疫霉的致病机制奠定了基础。

• 单位
  云南师范大学