中国人肠道产甲酸草酸杆菌甲酰辅酶A转移酶基因的分离、克隆和鉴定

作者:孔德波; 叶章群; 陈志强; 杨为民; 姚林方; 郭辉; 刘冠琳; 曾令启
来源:华中科技大学学报(医学版), 2007, (3): 314-317.
DOI:10.3870/j.issn.1672-0741.2007.03.010

摘要

目的 克隆产甲酸草酸杆菌甲酰辅酶A转移酶基因(frc),检测其在真核细胞中的表达.方法 用聚合酶链式反应技术从产甲酸草酸杆菌基因组DNA中扩增frc基因片段并插入真核表达载体获取重组质粒pEGFP-frc,通过限制性内切酶酶切电泳和测序鉴定重组质粒.重组质粒转染人胚肾293细胞,检测frc基因在mRNA和蛋白水平上的表达.被转染细胞在含草酸培养液中培养,检测0~72 h培养液中草酸浓度的变化.

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